TE pufr
TE pufr (Tris/EDTA pufr) je běžně používaný roztok s vlastnostmi pufru, uplatňující se v biochemické/molekulárně biologické laboratoři. Obsahuje látku Tris (tris(hydroxymethyl)aminometan) o koncentraci 10 mM a EDTA (ethylendiaminotetraoctová kyselina) o koncentraci 1 mM. Reakce TE pufru záleží na pH použitých Tris a EDTA, nicméně zpravidla se připravuje slabě zásaditý roztok (nejčastěji pH 7,4, 7,5 nebo 8,0).[1] Následně se doporučuje autoklávování připraveného roztoku, skladovat se může při pokojové teplotě.[2]
TE pufr se používá k eluci a také k dlouhodobému skladování nukleových kyselin (DNA, RNA). EDTA přítomná v TE pufru totiž chelatuje nebo vyvazuje hořečnaté ionty, čímž blokuje jakoukoliv nežádoucí činnost DNáz a do jisté míry i RNáz ve vzorku. Tris zase udržuje stabilní pH roztoku – výkyvy pH by jinak mohly v delším časovém měřítku depurinovat DNA a tím ji znehodnotit.[3]
Reference
- Current Protocols in Molecular Biology. [s.l.]: John Wiley & Sons, Inc., 2002. Dostupné online.
- SAMBROOK, Joseph; RUSSELL, David W. Molecular Cloning - A Laboratory Manual. 3. vyd. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001. ISBN 0-87969-576-5.
- Molecular Genomics Core [online]. UTMB. Dostupné online.